H5N1亚型禽流感病毒聚合酶酸性蛋白真核表达载体的构建与表达

来源 :江苏预防医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chengjun_80
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目的 构建甲型禽流感病毒H5N1亚型聚合酶酸性蛋白(PA)的真核表达载体,并表达其编码蛋白PA.方法 采用RT-PCR法扩增PA基因,克隆至pMD18-T载体中构pMD18-T-PA质粒.双酶切pMD18-T-PA质粒与pXJ40-HA质粒后,胶回收并连接目的片段,构建真核表达载体pXJ40-HA-PA,鉴定后转染293T细胞.采用免疫印迹法(Western blot)鉴定重组PA蛋白的表达.结果 成功构建了禽流感病毒H5N1亚型PA基因的真核表达载体,并在真核细胞中成功表达出分子量为75kD的重组蛋白.
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