【摘 要】
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目的:探讨NALP3炎性小体在非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的炎症发生发展中的可能作用。方法:选择THP-1构建体外巨噬细胞模型,用不同浓度的棕榈酸
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目的:探讨NALP3炎性小体在非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的炎症发生发展中的可能作用。方法:选择THP-1构建体外巨噬细胞模型,用不同浓度的棕榈酸干预24 h;用不同浓度的N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预处理细胞后加入高浓度的棕榈酸孵育24 h。分别用活性氧(reactive oxygen species,ROS)指示剂结合流式细胞仪检测THP-1中ROS的变化;ELISA检测细胞上清液中IL-1β的浓度;免疫荧光技术检测NALP3,caspase-1蛋白的表达;荧光定量PCR检测NALP3蛋白复合体各组分(NALP3,ASC,caspase-1)mRNA的表达水平。结果:与空白组相比,各棕榈酸组细胞内ROS增加,NALP3和caspase-1蛋白表达及其分泌IL-1β水平均增加(P<0.05),并随棕榈酸浓度增加而增强;NAC预处理后,与单纯棕榈酸组相比,各NAC组THP-1产生ROS水平均下降,同时NALP3和caspase-1蛋白表达水平,NALP3复合体各组分mRNA水平及其分泌IL-1β的能力均降低(P<0.05),此抑制作用随NAC浓度增加而增强。结论:游离脂肪酸可通过产生ROS调节巨噬细胞NALP3炎性小体信号通路的活化引起炎症因子分泌,该通路可能是NASH的发病机制之一。
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