【摘 要】
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目的 研究蜂斗菜素对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及潜在机制.方法 以蜂斗菜素0μmol/L为对照,用5、15、45μmol/L的蜂斗菜素处理宫颈癌SiHa细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞在24、48和72 h的增殖活性,蛋白质印迹法(Western blotting)检测SiHa细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cleaved-casp
【机 构】
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洛阳市妇幼保健院产一科,河南 洛阳471000
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目的 研究蜂斗菜素对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及潜在机制.方法 以蜂斗菜素0μmol/L为对照,用5、15、45μmol/L的蜂斗菜素处理宫颈癌SiHa细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞在24、48和72 h的增殖活性,蛋白质印迹法(Western blotting)检测SiHa细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cleaved-caspase-9)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、丝/苏氨酸蛋白激酶(AKT)和磷酸化的丝/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;然后用AKT信号通路激活剂IGF-1处理细胞,检测其对蜂斗菜素处理后的SiHa细胞的影响.结果 与对照相比,5、15、45μmol/L的蜂斗菜素处理宫颈癌SiHa细胞后,在24、48和72 h细胞OD值均显著降低,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05),细胞中cyclin D1、CDK2、p-PI3K和p-AKT表达量均降低(P<0.05),Cleaved caspase-3和Cleaved caspase-9蛋白表达升高,细胞凋亡率升高,G0～G1期细胞百分比显著升高(P<0.05),S期细胞百分比显著降低(P<0.05),说明蜂斗菜素可使SiHa细胞滞留在G0～G1期,抑制AKT信号通路,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;AKT信号通路激活剂IGF-1部分逆转了蜂斗菜素对SiHa细胞增殖、凋亡、细胞周期和AKT信号通路的影响.结论 蜂斗菜素可能通过AKT信号通路调控宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡.蜂斗菜素对宫颈癌具有潜在抑制作用.
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