SV40T基因介导的永生化对细胞生物学特性的影响

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目的 研究SV40 T基因对其诱导的永生化细胞系细胞表型的影响.方法以手术切除的卵巢肉瘤样癌腹壁转移组织为材料,进行体外培养.将永生化基因--SV40 T抗原基因转染第10代细胞,经筛选,抗性克隆扩大培养,得到永生化细胞系.通过光学显微镜、电子显微镜、生长曲线测定、染色体分析、双层软琼脂培养、裸鼠接种、免疫组化等,研究转染与未转染细胞的生物学特性,通过四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)在相同条件下检测转染与未转染细胞对顺铂、阿霉素、足叶乙甙、拓扑替康四种化疗药物的敏感性.结果建立人卵巢肉瘤样癌细胞系,命名为BUPH:OVSC-1.经SV40T抗原基因转染,建立人卵巢肉瘤样癌永生化细胞系,命名为BUPH:OVSC-2,两者均已长期稳定传代.通过比较,两者的生物学特性无明显差别,对不同化疗药物的敏感性无明显差别.结论 SV40 T基因永生化的细胞保留了原细胞的分化表型,SV40介导的永生化细胞系可作为体外研究的模型。

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