【摘 要】
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对来源于黑曲霉N25(Aspergillus niger China Strain)的植酸酶基因phyA进行PCR介导的定点突变,不改变其所编码氨基酸,选用毕赤酵母偏爱的密码子对该基因保守序列中第81位和第
【机 构】
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四川农业大学,生命理学院,动物科技学院
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对来源于黑曲霉N25(Aspergillus niger China Strain)的植酸酶基因phyA进行PCR介导的定点突变,不改变其所编码氨基酸,选用毕赤酵母偏爱的密码子对该基因保守序列中第81位和第85位的Arg密码子进行同义突变.构建了含正确突变的克隆载体pUC18-phyAm和酵母表达载体pPIC9kphyAm,电击转化毕赤酵母,经MM、MD平板筛选和产物的酶活性测定,筛选出突变与未突变高酶活酵母转化子各2株.这4株转化子的Southern印迹结果表明,phyA基因以单交换方式单拷贝整合到酵母
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