【摘 要】
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目的 寻找膀胱尿路上皮癌(BUC)患者与健康志愿者尿液蛋白质组学差异,为BUC的早期诊断奠定基础.方法 采用25％乙醇沉淀法制备尿液双向电泳样品,尿液蛋白经双向凝胶电泳(2-DE)分离后行考马斯亮蓝染色,利用PDQuest8.0 2D凝胶图像分析软件进行分析,所得差异蛋白点用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱仪(MALDI-TOF-TOF-MS)进行肽序测定,结合Swiss-Prot蛋白质数据库
【机 构】
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063000唐山,河北联合大学基础医学院,天津医科大学第二医院天津市泌尿外科研究所肿瘤免疫室,天津市泌尿外科基础医学重点实验室,天津医科大学第二医院天津市泌尿外科研究所肿瘤免疫室,天津市泌尿外科基础医
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目的 寻找膀胱尿路上皮癌(BUC)患者与健康志愿者尿液蛋白质组学差异,为BUC的早期诊断奠定基础.方法 采用25％乙醇沉淀法制备尿液双向电泳样品,尿液蛋白经双向凝胶电泳(2-DE)分离后行考马斯亮蓝染色,利用PDQuest8.0 2D凝胶图像分析软件进行分析,所得差异蛋白点用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱仪(MALDI-TOF-TOF-MS)进行肽序测定,结合Swiss-Prot蛋白质数据库对差异蛋白进行初步鉴定,并应用Western blot方法对差异蛋白在两组间的差异表达情况进行验证.结果 获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳图谱.BUC组与对照组凝胶的蛋白质点数分别为(789±18)个和(762± 14)个；与对照组比较,BUC组有6个蛋白质点表达明显下调,11个蛋白质点表达明显上调.经质谱分析后,初步鉴定了5种蛋白质,分别为纤维蛋白原、乳酸脱氢酶B、载脂蛋白A1、丛生蛋白和触珠蛋白,均在BUC组呈表达增高趋势.Western blot验证了双向凝胶电泳结果.结论 BUC患者与健康志愿者的尿液蛋白质组存在明显的差异,差异蛋白的鉴定为进一步寻找BUC早期诊断的分子标志物提供了研究基础和依据。
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