维吾尔药材菠菜子的DNA条形码鉴定及质量控制研究

来源 :中国民族民间医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pjq521
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目的:基于DNA条形码分子鉴定法建立维吾尔药材菠菜子的鉴定方法,并构建菠菜子HPLC指纹图谱和其指标性成分β-蜕皮甾酮的HPLC含量测定方法,为菠菜子的质量控制提供参考.方法:以核糖体DNA第二内部转录间隔区(ITS2)为主体条形码序列对菠菜子进行DNA条形码鉴定;采用Agilent ZORBAX SB-Aq C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相梯度洗脱(0~ 10 min,10%A;10 ~ 20 min,10% →30%A;20 ~40 min,30%→40% A;40 ~65 min,40%→80%A),检测波长240 nm,建立菠菜子的HPLC指纹图谱方法;采用Agilent ZORBAX SB-Aq C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相梯度洗脱(0~15 min,45%→40%A;15 ~ 25 min,40%→80%A;25 ~30 min,80% →45%A;30 ~ 45 min,45% A),检测波长248 nm,建立指标性成分β-蜕皮甾酮的HPLC含量测定方法.结果:DNA条形码鉴定系统进化树显示,ITS2序列可将菠菜子与其近缘物种很好区分,且分支支持率达100%;HPLC指纹图谱标定7个共有峰,10批菠菜子药材与对照图谱的相似度均大于0.95;指标性成分β-蜕皮甾酮在6.115 ~ 122.304 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9997),重复性试验RSD<2.0%,加样回收率为97.43% ~ 103.59%,10批样品中β-蜕皮甾酮的含量为0.099% ~0.241%.结论:DNA条形码可准确鉴定菠菜子的基原,HPLC指纹图谱专属性强,结合指标性成分β-蜕皮甾酮的含量测定可以控制菠菜子药材的质量.
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