人白细胞介素10重组腺病毒载体的构建

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lbo

【摘要】

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目的构建人白细胞介素10重组腺病毒载体,为真核表达及其临床研究提供实验基础.方法自行设计一对引物,应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,从活化的正常人外周血单个核细胞

【作者】

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黄宗文修清玉韩焕兴石昭泉

【机构】

：

第二军医大学长征医院呼吸内科,第二军医大学长征医院实验科

【出处】

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免疫学杂志

【发表日期】

：

2001年5期

【关键词】

：

白细胞介素10 腺病毒 CDNA 序列测定 interleukin10 adenovirus cDNA sequ encing

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目的构建人白细胞介素10重组腺病毒载体,为真核表达及其临床研究提供实验基础.方法自行设计一对引物,应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,从活化的正常人外周血单个核细胞中扩增出hIL-10cDNA,并将hIL-10cDNA克隆到腺病毒载体pAdCMV-Link1中,构建pAdCMV/hIL-10表达质粒.将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共转染293细胞,通过同源重组产生hIL-10重组腺病毒.结果扩增到的cDNA片段经酶切鉴定、PCR扩增、DNA测序最终确定为hIL-10cDNA;所得人白细胞

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