【摘 要】
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从筛选出的Bacillus subtilisWSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入载体pET22b(+)多克隆位点,得到带有前导序列PelB重组质粒pET22b(+)PL。以pET2
【机 构】
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江南大学生物工程学院环境生物技术研究室工业生物技术教育部重点实验室; 江南大学生物工程学院环境生物技术研究室工业生物技术教育部重点实验室 无锡214036; 无锡214036;
【基金项目】
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国家“863计划”(2003AA322050)~~
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从筛选出的Bacillus subtilisWSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入载体pET22b(+)多克隆位点,得到带有前导序列PelB重组质粒pET22b(+)PL。以pET22b(+)PL为模板扩增出带前导序列的碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入温控载体pHsh,重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达。其表达量与以T7为启动子的重组菌BL21DE3[(pET22b(+)PL]相比,表达量相近。SDS-PAGE分析显示表达产物的分子量均为43kDa,同核酸序列测定所推导的值相符。研究表明利用pHsh构建的JM109(pHsh PL)诱导表达好,诱导方式简单廉价,这对该酶的大规模发酵具有重要意义。
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