目的建立同时测定SD大鼠组织中替诺福韦、拉米夫定和依非韦伦的LC-MS/MS分析方法,并研究三药联用口服给药后各药物在SD大鼠体内的组织分布。方法以恩曲他滨为内标,通过甲醇沉淀组织样品蛋白,取上清液进行LC-MS/MS分析。采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,以水(含25 mmol·L^-1醋酸铵+0.1%甲酸)-甲醇为流动相,梯度洗脱,正离子多反应监测（MRM）检测。结果在线性范围内替诺福韦、拉米夫定及依非韦伦的线性关系良好,日内和日间精密度、准确度、回收率、稳定性等均符合生物样品定量分析要求。各药物广泛分布于SD大鼠体内,其中替诺福韦和拉米夫定在肾组织中含量最高,脑组织中最少;依非韦伦在肝组织中含量最高,肺组织中最少。结论本方法快速、灵敏、准确,适用于新型抗艾滋病复方药物在SD大鼠体内的组织分布研究。