【摘 要】
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以橄榄油为唯一碳源对富含油污土壤中产脂肪酶微生物进行富集培养,以溴甲酚紫为指示剂进行初筛,结合橄榄油乳化液滴定法测定酶活力,得到酶活力较高的产脂肪酶菌株Y19,其粗酶
【机 构】
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四川大学生命科学学院/生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都理工大学材料与化学化工学院/矿产资源化学重点实验室,西南石油大学化学化工学院,成都生物制品研究所
【基金项目】
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国家基础专项(SB2007FY400-4);成都理工大学青年基金(2011QJ04)
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以橄榄油为唯一碳源对富含油污土壤中产脂肪酶微生物进行富集培养,以溴甲酚紫为指示剂进行初筛,结合橄榄油乳化液滴定法测定酶活力,得到酶活力较高的产脂肪酶菌株Y19,其粗酶活力为16.88 U/mL,经16S rDNA初步鉴定为枯草芽孢杆菌。通过特定引物PCR扩增菌株Y19脂肪酶lipA基因,构建pET32a-lipA重组表达载体并在大肠杆菌中诱导表达。以表达菌的细胞裂解物进行生物柴油转酯试验,GC/MS结果显示,重组脂肪酶lipA粗酶液催化的转酯产物中脂肪酸甲酯成分与生物柴油十分相近。
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