【摘 要】
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本试验针对临床上经常混合感染又难以鉴别诊断的伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2(PCV-2),建立了可用于这3种病毒混合感染检测和鉴别诊断的多重荧光PCR方法。所建立的多重荧光PCR扩增效率E值、R2及斜率均在正常范围内,与单一荧光PCR相比,回归系数R2达到了0.999,多重反应体系并没有对扩增产生明显干扰。方法特异性和敏感性测试表明,该方法特异性可达到100%,不存在任何交叉反应,敏感性可以达到10拷贝/μL。对收集的132份阳性样品
【机 构】
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中国海关科学技术研究中心,北京海关
【基金项目】
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国家重点研发计划(2016YFD0500705)。
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本试验针对临床上经常混合感染又难以鉴别诊断的伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2(PCV-2),建立了可用于这3种病毒混合感染检测和鉴别诊断的多重荧光PCR方法。所建立的多重荧光PCR扩增效率E值、R2及斜率均在正常范围内,与单一荧光PCR相比,回归系数R2达到了0.999,多重反应体系并没有对扩增产生明显干扰。方法特异性和敏感性测试表明,该方法特异性可达到100%,不存在任何交叉反应,敏感性可以达到10拷贝/μL。对收集的132份阳性样品
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为探究不同发育期牦牛肺组织中血管生成相关基因的表达情况,根据不同时期牦牛肺组织转录组测序结果,对转录组数据进行分析,并对血管生成相关基因进行分析。结果显示:(1)1日龄和30日龄组别中差异表达基因311个,其中上调基因139个,下调基因172个;30日龄和180日龄组别中差异表达基因3190个,其中上调基因1775个,下调基因1415个;180日龄和成年组别中差异表达基因693个,其中上调基因430个,下调基因263个;30日龄和180日龄组别中差异表达基因最多。(2)3个比较组别中的共同差异基因18个,
为了解2017—2019年四川地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行情况,对收集的47份PRRSV阳性样品进行ORF5基因的扩增、测序,应用DNASTAR和MEGA软件对核苷酸序列及其推导的氨基酸序列进行同源性和遗传演化分析。结果显示,47条ORF5序列之间的核苷酸同源性为84.2%~100.0%,与PRRSV原始毒株LV和VR-2332的核苷酸同源性分别为60.7%~64.6%、84.9%~99.3%,表明分离毒株均属于PRRSV2。对其中35个ORF5基因序列进行遗传演化分析,结果发现,四川地
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本研究以牛源链球菌48株为宿主,经双层琼脂平板反复纯化从污水中分离到毒性噬菌体SP48。透射电镜观察发现,SP48属于长尾噬菌体科;酶切分析表明,SP48的基因组大于60 kb,可被限制性核酸内切酶Eco R I、Xho l I和Bln I切开。对乙醚、氯仿不敏感,对40~45℃或pH 5~10的环境有很好的耐受性;最佳感染复数为10,潜伏期约30 min,爆发期约80 min,平均爆发量为45 PFU/cell。
为了快速发现细胞培养过程中的支原体污染,并在污染发生早期有效去除,从而挽救细胞。以吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞为研究对象,通过显微镜直接观察法、DNA荧光染色法结合检测细胞,可在1 h内快速发现细胞是否存在支原体污染。对疑似支原体污染的试验组细胞使用25μg/mL支原体抗生素(Plasmocin)连续处理14 d,再通过上述2种方法和PCR法结合检测细胞中是否仍存在支原体污染,绘制药物处理后试验组细胞的生长曲线。结果表明,支原体污染早期,用25μg/mL Plasmocin连续处理试验组细胞14 d后,高倍显
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