草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白的原核表达

来源 :华中农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jiajiawangwang

【摘要】

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根据草鱼呼肠孤病毒广东株GCRV-GD108编码VP5的M5基因的cDNA序列,分别设计合成带特定酶切位点的特异引物,进行PCR扩增;通过酶切与连接,构建2种重组表达载体pET30c-M5和pCold

【作者】

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王杭军叶星田园园张莉莉瞿兰张蕊

【机构】

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中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室,上海海洋大学水产与生命学院

【出处】

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华中农业大学学报

【发表日期】

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2013年2期

【关键词】

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草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株 M5基因免疫印迹原核表达纯化 GCRV-GD108 M5 gene Western blot prokaryo

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根据草鱼呼肠孤病毒广东株GCRV-GD108编码VP5的M5基因的cDNA序列,分别设计合成带特定酶切位点的特异引物,进行PCR扩增;通过酶切与连接,构建2种重组表达载体pET30c-M5和pColdⅡ-M5,分别转化于大肠杆菌并进行诱导表达;对培养基、诱导时间、诱导剂浓度和温度等条件进行优化,确定最适表达体系。通过SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。结果显示,所构建的2种VP5蛋白原核表达载体,均在大肠杆菌中成功表达了分子质量大小（约80ku）与预期相符的重组蛋白,表达产物主要

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