探讨肿瘤坏死因子 α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)对人胰腺癌PaTu8988细胞核因子κB(NF-κB)及Hedgehog(HH)通路成员Shh、SMO、Gli1、SuFu基因表达的影响。
方法分别应用TNF-α和IL-1β刺激人胰腺癌PaTu8988细胞48 h,以未处理细胞作为对照组。采用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞NF-κB及Shh、SMO、Gli1、SuFu的mRNA和蛋白表达,采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡。
结果TNF-α刺激组、IL-1β刺激组、对照组PaTu8988细胞的NF-κB mRNA表达量分别为9.92±0.78、7.74±0.32、1.01±0.08;Gli1 mRNA为7.25±0.45、5.74±0.33、1.00±0.06;Shh mRNA为3.60±0.36、4.33±0.45、1.00±0.04;SMO mRNA为1.03±0.15、1.07±0.16、1.01±0.06;SuFu mRNA为0.88±0.14、0.96±0.13、1.01±0.05。其中TNF-α刺激组、IL-1β刺激组的NF-κB、Gli1、Shh mRNA表达量均较对照组显著增加,差异有统计学意义(P值<0.05或<0.01)。两刺激组的NF-κB、Gli1、Shh蛋白表达量也较对照组增高,差异具有统计学意义(P值均<0.05)。TNF-α刺激组、IL-1β刺激组、对照组PaTu8988细胞凋亡率分别为(17.40±2.87)%、(11.05±1.34)%、(49.90±2.96)%,TNF-α刺激组、IL-1β刺激组的细胞凋亡率均较对照组显著减少,差异有统计学意义(P值均<0.01)。
结论TNF-α和IL-1β可激活PaTu8988细胞的NF-κB和HH信号通路的Shh、Gli1基因的表达,减少细胞的凋亡。