【摘 要】
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目的 用纯化的人血管生成素2(Ang2)蛋白,通过噬菌体展示技术从非免疫小鼠噬菌体展示抗体库中淘选、鉴定Ang2单链抗体.方法 以纯化的人Ang2蛋白为抗原,对非免疫小鼠噬菌体展示抗体库进行富集和筛选,获得Ang2单链抗体,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot法检测目的蛋白的表达并测序.结果 经过3轮富集和筛选,获得了1个能特异性识别Ang2蛋白的阳
【机 构】
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目的 用纯化的人血管生成素2(Ang2)蛋白,通过噬菌体展示技术从非免疫小鼠噬菌体展示抗体库中淘选、鉴定Ang2单链抗体.方法 以纯化的人Ang2蛋白为抗原,对非免疫小鼠噬菌体展示抗体库进行富集和筛选,获得Ang2单链抗体,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot法检测目的蛋白的表达并测序.结果 经过3轮富集和筛选,获得了1个能特异性识别Ang2蛋白的阳性噬菌体克隆,DNA测序表明其含有完整的单链抗体基因片段,大小约750 bp,表达蛋白相对分子质量约33.7×103；通过SDS-PAGE进一步实现Ang2单链抗体(phage-Ang2-scFv)的鉴定.结论 成功分离并鉴定人Ang2-scFv,为进一步的功能学研究奠定了基础。
其他文献
目的 探讨应用三维鸟枪法( Shot-gun)串联质谱分析技术研究脊髓室管膜瘤和正常室管膜蛋白表达谱的可行性.方法 分别采集8例脊髓室管膜瘤标本和4例室管膜标本获取蛋向,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),考马斯亮篮染色、切胶和酶解,串联质谱获取肽质量指纹图谱并鉴定和生物信息学分析. 结果 室管膜组鉴定组2758蛋白,室管膜瘤组鉴定2721个蛋白.其中1631个蛋白质在肿瘤
目的 建立猪主动脉内皮细胞株,为以猪为供体的异种移植研究提供必要的细胞水平研究平台.方法 分离健康幼猪主动脉内皮细胞并用携带链霉素抗性和猿猴病毒40大T抗原(SV40LT)基因的慢病毒转染细胞.检测SV40LT基因和α-1,3-半乳糖转移酶(α-1,3-GT)基因和d-1,3-半乳糖抗原表达.最后测定2类细胞与人血清发生反应的能力.结果 聚合酶链反应(PCR)结果显示,SV40LT基因在转染后细胞
食管癌手术范围广、创伤大,机体应激反应强烈,由此引起的高分解代谢还会引起患者肝功能异常,严重影响患者术后康复,增加并发症的发生率[1].快速康复外科(FTS)是指在围手术期采取一系列优化措施,以减少或减轻手术患者生理及心理创伤应激反应,其核心是减少机体应激反应[2].本研究旨在探讨快速康复外科在食管癌治疗中应用对患者肝功能的调节作用。
目的 观察热疗联合放疗对人横纹肌肉瘤(RMS) RD细胞的杀伤作用,比较热疗和放疗次序不同产生的杀伤效果.方法 人横纹肌肉瘤RD细胞根据不同处理方法分为5组:单纯放疗组、单纯热疗组、热疗后放疗组、放疗后热疗组和对照组.每组各21瓶细胞,5000个细胞/瓶,放疗剂量4 Gy,源距80 cm,照射面积12 cm×8 cm.热疗使用电热恒温水浴箱,温度为42.5℃持续1h,热平衡时间为5 min.相应处
目的 探讨Omi/HtrA2与食管鳞状细胞癌(ESCC)临床病理生理特征的关系.方法 采用免疫组织化学En Vinsion system法检测40例食管鳞癌组织、40例癌旁组织及13例食管良性病变黏膜组织中Omi/HtrA2的表达.结果 Omi/HtrA2的阳性表达率在食管癌组织中为70.00％,癌旁组织Omi/HtrA2为27.50％,食管良性病组织为23.08％ (P ＜0.05)；在中高分化
黑色素瘤是恶性程度最高的肿瘤之一,原发性黑色素瘤颅内转移发生率高达75％[1].我们使用A375黑色素瘤细胞株建立颅内移植瘤模型,同时建立皮下模型并与前者在致瘤特点与移植瘤病理上进行比较.一、材料与方法DMEM培养基购自Gibco公司,胎牛血清购自Gibco公司,苏木素-伊红(HE)染色液购自Sigma-aldrich公司,倒置相差显微镜(Olympus),CO2细胞培养箱(Thermo),A37
目的 观察白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达及钾离子敏感试验(PST)与间质性膀胱炎(IC)的关系.方法 12例IC患者为实验组(男6例,女6例),12例Ⅲ型前列腺炎患者为对照组.分别比较2组PST评分、膀胱黏膜肥大细胞的数目、IL-6蛋白表达的差异.结果 实验组PST评分数(3.75±0.62)高于对照组(0.17 ±0.39),差异有统计学意义(P＜0.05).实验组标本中肥大细胞数目明显高于
腰骶丛的主要部分位于骨盆内,受到稳定的骨盆骨性结构保护,其损伤在临床上较为少见.近年来骨盆骨折并发腰骶丛神经损伤报道逐年增多,骨盆骨折合并神经损伤发病率1992年报道为33.0％[1],2000年报道为25.6％[2]。
目的 应用比较蛋白组学研究胃癌腹膜转移形成相关的蛋白质分子标志物.方法 以胃癌细胞株(BGC823)和腹膜高转移潜能的胃癌细胞株(SCG7901)为研究对象,采用双向凝胶电泳(2-DE)对其进行总蛋白的分离,两组之间的差异蛋白通过质谱分析和蛋白数据库搜索鉴定,并用Western blot法对差异蛋白点进行进一步检测验证.结果 腹膜高转移潜能的胃癌细胞株(SCG7901)与胃癌细胞株(BGC823)
本研究旨在观察丹参川芎嗪对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺微循环的影响,现报道如下.一、材料和方法:1.材料:将Wistar大鼠随机分为A、B两组.A组采用多普勒血流仪测定测定胰腺微循环血流、采用keiji等的方法检测微血管通透性;B组测定血液流变学及病理评分。