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目的
观察自组装纳米多肽与人脂肪间充质干细胞(Ad-MSCs)3D打印出的组织工程学模型内细胞生长状态及多向分化能力。
方法分离、培养原代Ad-MSCs,流式细胞仪鉴定,以自组装纳米多肽、Ad-MSCs混合溶液为"生物墨汁",利用3D生物打印技术,打印组织工程学模型。诱导其内的Ad-MSCs成骨和成脂分化并分别与对照组进行染色比较。
结果原子力显微镜下观察到纳米多肽纤维结构直径为10~30 nm,长200~500 nm,具有纳米级材料特点。流式细胞仪鉴定可见分离、培养的细胞CD29(98.51%)、CD90(97.87%)、CD166(98.32%)表达阳性,不表达CD31(1.58%)、CD34(2.42%)、CD45(2.95%)和人类白细胞抗原DR基因(HLA-DR)(0.53%),符合Ad-MSCs免疫表型。随后利用"生物墨汁"打印出组织工程模型,对并其内的Ad-MSCs进行诱导分化,分别对实验组和对照组进行相关染色,茜素红S染色可见成骨诱导实验组中钙结节形成,油红O染色可见成脂诱导实验组Ad-MSCs内脂滴着色,两对照组不着色。
结论以自组装纳米多肽、脂肪间充质干细胞混合溶液为"生物墨汁"3D打印出的组织工程学模型内Ad-MSCs生长状态良好,仍具有较强的分化能力。