【摘 要】
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目的克隆人MAGE-3基因片段,以构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-MAGE-3,为制备以MAGE-3基因片段为基础的核酸疫苗及探讨相关的肿瘤免疫治疗提供实验依据.方法RT-PCR法从肝癌组织
【机 构】
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河南职工医学院实验中心,河南职工医学院病理生理学教研室,郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室
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目的克隆人MAGE-3基因片段,以构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-MAGE-3,为制备以MAGE-3基因片段为基础的核酸疫苗及探讨相关的肿瘤免疫治疗提供实验依据.方法RT-PCR法从肝癌组织制备出含BamHI、EcoRI酶切位点的MAGE-3基因片段,pGEM-T Easy为克隆载体,pcDNA3.1为真核表达载体,采用DNA重组技术,将目的基因先克隆至pGEM-T Easy载体再亚克隆至pcDNA3.1载体上,然后,据氨苄青酶素(Amp)抗性、蓝白筛选实验、克隆鉴定引物T7/SP6PCR扩增方法鉴
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