链霉菌分化关键基因——whiG在大肠杆菌的克隆和高表达

来源 :中国科学(B辑 化学 生命科学 地学) | 被引量 : 23次 | 上传用户:xiaogege0451
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
whiG结构基因翻译起始位点邻近的序列区域被改造了6个碱基。利用聚合酶链式反应(PCR)扩增了该基因,序列分析验证了改造后的整个DNA序列,并定向克隆到大肠杆菌高效表达载体pET11c的T7噬菌体10启动子的下游,转化可被IPTG诱导产生T7 RNA聚合酶的受体菌株——大肠杆菌BL21(DE3)。诱导后的重组菌株,经蛋白提取,SDS-PAGE结果表明whiG在大肠杆菌中获得了高效表达,其表达量约为不溶性蛋白总量的20%。经抗体制备,Western杂交证明了高效表达的产物确是whiG的编码产物——σ~
其他文献
引入“代谢库”概念,建立了由沙体、植物、大气三代谢库及其相应的通道所组成的生态系统模型,并以氚水核示踪动力学等方法测定了植物蒸腾等水分平衡的各收支项,给出了植物水平衡表,从而对我国腾格里沙漠东南缘沙坡头地区草原化荒漠生态环境下的植物水平衡进行了综合分析。
期刊
从家蚕核多角体病毒(BmNPV)基因组克隆得到含同源重复序列3(hr3)的Pst I K片断。证明含hr3的质粒DNA以野生型BmNPV为辅助病毒,在BmN细胞中能够复制,表明hr3是BmNPV的DNA复制起始点。BmNPV的hr3以野生型苜蓿尺蠖核多角体病毒(AcNPV)为辅助病毒转染Sf9细胞亦得到复制,说明与AcNPV复制有关的因子亦能作用于BmNPV的复制起始点。测定了hr3的全序列,并和
期刊
以内蒙古白乃庙铜矿床、金矿床及江西武山铜矿床为例,从空间分布、围岩、蚀变、微量元素、元素垂向分带序列、花岗岩成矿的专属性、成矿模式及稳定同位素等方面论述花岗岩与有关矿床的关系,认为形成矿床的含矿热液主要是从含矿花岗岩浆冷凝形成花岗岩体过程中分出,从而导致花岗岩与有关矿床在空间上共生。
期刊
用简单的非线性动力学模型研究了基本气流场对中高纬度大气季节内振荡不稳定激发的影响,结果表明,西风廓线对不稳定模有重要影响,不同的西风廓线所激发的不稳定模不仅增长率不同,频谱位置也不一样;对于实际大气中常见的西风廓线形式,在季节内(30~60d)振荡频谱带有最不稳定模出现;基本气流强度及其经向梯度对不稳定模也有明显影响。用实际观测资料进行验证,得到了同动力学理论分析完全一致的结果。
期刊
蜂毒素不同程度地减慢紫膜中三体菌紫质(BR)光循环中间体M的快(M_(412f))、慢(M_(412s))衰减成分,却加快Triton X-100增溶的BR单体的M_(412s)。蜂毒素对两种BR M_(412s)的影响均随体系pH提高而增强。pH5.5~8.8时,蜂毒素对紫膜M产量影响甚小,却使M_(412s)产量先减小后增大。蜂毒素使单体易于漂白,提高pH则漂白更加明显。实验结果支持蜂毒素与菌
期刊
用透射电子显微镜观察了文昌鱼不同发育时期卵巢滤泡细胞的超微结构。结果表明文昌鱼卵巢中只有一种类型的滤泡细胞。发现了这种细胞与类固醇激素生物合成有关,其结构特点是:(1)椭圆形或卵圆形带管状线粒体,(2)滑面内质网,(3)胞质中有大的脂滴,(4)发育良好的高尔基器复合体和管状粗面内质网。这些特点与哺乳动物中的膜细胞(theca cell)的结构相似。因此,认为文昌鱼卵巢的滤泡细胞就是类固醇激素细胞。
期刊
对近40a来全球冰川波动的分析表明,冰川波动显示出明显的区域性特点。北欧和高亚地区的冰川波动幅度较小,以退缩为主,而北美和阿尔卑斯山区的冰川则显示出较大的波动,出现了明显的冰川前进,不同规模的冰川对气候变化反应的敏感性不同,且大、小冰川之间对气候变化的反应存在着滞后关系。从全球冰川波动来看,冰川波动与气候变化具有很好的对应关系。全球范围内大冰川(长度>5km)波动滞后气候变化约8a左右,而小冰川(
期刊
以古里雅冰芯中δ~(18)O和积累量的记录为基础,论述了小冰期以来古里雅冰芯所反映的气候变化特征。自1570年以来,古里雅冰芯所记录的气候经历了几次明显的变化,17世纪和19世纪是400多年来的相对寒冷和少雨时期;18世纪和20世纪是400多年来的相对温暖和多雨时期。古里雅冰芯反映了这一地区温度和降水的密切关系:温度上升对应降水增加,温度下降对应降水减少。这种关系与季风对本区的影响具有内在联系。
期刊
研究了3种新的直链醚席夫碱钆配合物在固态和溶液状态以及配体中亚乙氧基链长和取代基不同时对EPR特性的影响。总结了规律性,特别是考察了不同温度下及各种溶剂中EPR特性的差异。首次观测到低温下THF引起的“单峰效应”,并作了解释。
期刊
采用放射受体结合法及分子筛HPLC分析研究人白血病细胞株HL-60细胞核内的维甲酸(RA)受体。发现HL-60细胞核内存在RA特异结合部位。Scatchard分析表明结合呈单位点,ku为2.03nmol/L,Bmax为1352.6pmol/mg protein。分子筛HPLC分析表明结合位点的分子量约为50ku。这些结果提示HL-60细胞核内存在的RA特异结合位点具有受体性质。细胞总RNA与维甲酸
期刊