鼠A20基因的腺病毒载体构建及耳蜗毛细胞表达

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ARMYUN1981

【摘要】

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目的构建鼠锌指蛋白A20基因的重组腺病毒载体，并观察其对豚鼠耳蜗毛细胞的感染情况。方法采用基因工程技术，经亚克隆后将A20基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上，利用pAdEasy

【作者】

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袁伟张学渊侯春丽魏勇朱楚洪

【机构】

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第三军医大学西南医院耳鼻咽喉科,第三军医大学解剖学教研室

【出处】

：

免疫学杂志

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

：

腺病毒 A20基因同源重组 Adenovirus A20 gene Homogenous recombination

【基金项目】

：

重庆市自然科学基金资助项目

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目的构建鼠锌指蛋白A20基因的重组腺病毒载体，并观察其对豚鼠耳蜗毛细胞的感染情况。方法采用基因工程技术，经亚克隆后将A20基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上，利用pAdEasy系统进行细菌内同源重组后，脂质体转染HEK293细胞包装、扩增，将重组腺病毒感染耳蜗毛细胞。PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定，利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因对病毒滴度和感染情况进行监测。结果酶切鉴定及PCR结果表明A20基因重组腺病毒载体构建成功，病毒滴度达5×10^9pfu／mL，并对耳蜗毛细

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