【摘 要】
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目的研究信号转导与转录因子3(STAT3)信号通路对RA患者外周血调节性T细胞功能的影响,探讨其与功能异常相关的调控机制。方法选择RA患者60例和健康对照(健康志愿者)组60名,采集受试者外周肝素抗凝静脉血。采用流式细胞仪检测外周血中调节性T细胞的比例,用体外淋巴细胞混合培养方法检测RA患者和健康人外周血中调节性T细胞的增殖活性及对效应性T细胞(Tresp)的抑制功能,用流式细胞仪及qRT-PCR
【机 构】
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郑州大学医学科学院 450052,郑州大学第五附属医院检验科 450052,
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目的研究信号转导与转录因子3(STAT3)信号通路对RA患者外周血调节性T细胞功能的影响,探讨其与功能异常相关的调控机制。
方法选择RA患者60例和健康对照(健康志愿者)组60名,采集受试者外周肝素抗凝静脉血。采用流式细胞仪检测外周血中调节性T细胞的比例,用体外淋巴细胞混合培养方法检测RA患者和健康人外周血中调节性T细胞的增殖活性及对效应性T细胞(Tresp)的抑制功能,用流式细胞仪及qRT-PCR检测调节性T细胞中磷酸化STAT3蛋白及分泌促炎因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A的水平。再用STAT3通路抑制剂Stattic V处理RA患者调节性T细胞,观察其增殖及抑制功能的恢复及分泌促炎因子的变化。组间比较采用方差分析,两两比较采用Dunnett′s检验。
结果RA患者组外周血调节性T细胞数量(6.51±0.24)%与健康对照组(2.23±0.18)%比较差异有统计学意义(t=4.22,P<0.05);RA组患者外周血调节性T细胞增殖活性及对Tresp细胞的抑制功能明显降低(t分别为4.23和4.35,均P<0.05),磷酸化STAT3表达水平显著升高(t=3.84,P<0.05),分泌促炎因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A的水平升高(t分别为3.61、2.51和2.69,均P<0.05)。经50 μg/L Stattic V作用后,RA患者调节性T细胞对Tresp抑制率为(61±5)%,未处理组为(28±10)%,2组差异有统计学意义(P<0.05);50 μg/L StatticV作用后,促炎因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A mRNA表达量(2-ΔΔCt)分别为(1.65±0.88、0.85±0.71、0.57±0.14),均显著低于未处理组分别为(23.32±6.71、4.85±1.53、3.10±0.62),差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论RA患者调节性T细胞对Tresp细胞的负向调控功能降低,其机制与STAT3信号通路异常活化有关,抑制STAT3通路的活化有可能一定程度地恢复调节性T细胞功能。
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