血红素合成酶特异性RNAi表达载体的构建及其干扰效果鉴定

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：edisonye

【摘要】

：

目的利用含红色荧光报告基因（DsRed）的pGCsi-U6／Neo／DsRed／质粒构建干扰人红系特异的γ-氨基-6-酮戊酸合成酶（eALAS）基因表达的短发夹RNA（shRNA）表达载体，并进行活性鉴定。方法根据GenB

【作者】

：

黄前川李津婴曹军皓丁进亚周虹许艳群

【机构】

：

广州军区武汉总医院,第二军医大学长海医院

【出处】

：

山东医药

【发表日期】

：

2009年13期

【关键词】

：

铁效应元件亚铁鳌合酶短发夹RNA iron-responsive elements erythrocyte aminolevulinlc acidsynt

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目的利用含红色荧光报告基因（DsRed）的pGCsi-U6／Neo／DsRed／质粒构建干扰人红系特异的γ-氨基-6-酮戊酸合成酶（eALAS）基因表达的短发夹RNA（shRNA）表达载体，并进行活性鉴定。方法根据GenBank中eALAS的序列，设计3条表达shRNA的互补DNA序列，分别克隆至质粒载体pGCsi-U6／Neo／DsRed中构建重组质粒，转化大肠杆菌DHSa菌株扩增后，提取质粒测序分析，以相同的方法构建并鉴定eALAS基因的真核表达载体pEGFP-N1-eALAS；将3种pGCsi-U6

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