重组蛹虫草超氧化物岐化酶脱辅基蛋白的表达、纯化及其活性重建

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:elrshay
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目的表达并纯化重组蛹虫草超氧化物歧化酶脱辅基蛋白,并考查各种金属离子对其活性重建的作用。方法用不含Cu^2+和Zn^2+的培养基培养重组菌株,并表达重组蛋白,采用DEAE—FF和CM-52进行纯化;在脱辅基蛋白溶液中加入Cu^2+、Mn^2+、Mg^2+、Ni^2+或Ag^+,测定SOD酶活力的变化。结果蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD在不含Cu^2+和Zn^2+的培养基中得到表达,纯化后的样品经SDS-PAGE分析,在相对分子质量17000处出现单一条带,经活性电泳分析无酶活力;脱辅基蛋白活性重建的最适宜
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