人UbcH10及其siRNA真核表达载体的构建与表达

来源 :放射免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chenyong198966

【摘要】

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目的：构建以人泛素结合酶UbcH10基因为基础的真核表达质粒pcDNA3.1（UbcH10）及其siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo（siRNA-UbcH10）,并在结肠癌细胞LOVO中表达与鉴定。方法：提取组织总RNA,

【作者】

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陈世敏徐春晓刘斌辛家璇刘贤锡

【机构】

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济南军区总医院实验诊断科,山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所

【出处】

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放射免疫学杂志

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

UBCH10 真核表达 SIRNA UbcH10 eukaryotic expression siRNA

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目的：构建以人泛素结合酶UbcH10基因为基础的真核表达质粒pcDNA3.1（UbcH10）及其siRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo（siRNA-UbcH10）,并在结肠癌细胞LOVO中表达与鉴定。方法：提取组织总RNA,通过RT-PCR扩增出UbcH10基因,克隆到真核表达载体pcDNA3.1的多克隆位点中,构建UbcH10的真核表达载体。通过siRNA设计软件选取UbcH10基因的siRNA片段合成构建表达载体pGPU6/GFP/Neo（siRNA-UbcH10）。然后采用脂质体转染法将其分别

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