基于玄府理论探索汗法与补法治疗局灶节段硬化大鼠足细胞损伤的TRPC机制

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目的:研究汗法与补法治疗嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的局灶节段硬化性肾病(FSGS)大鼠足细胞损伤的疗效及机制。方法:40只雄性Wistar大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、越婢汤组、固精方组。首剂静脉注射PAN 9mg/100g,后分别于第13、16、19、22、25天追加PAN 0.9mg/100g建立FSGS大鼠模型,8周后留取尿液、血液及肾组织标本。检测血生化指标,尿蛋白排泄,Real-time PCR、Western blotting、免疫荧光观察TRPC5、TRPC6表达与分布,激光共聚焦显微镜观察足细胞骨架蛋白F-actin,光镜观察肾小球病理改变,透射电镜观察足细胞超微结构。结果:模型组大鼠出现肾小球局灶节段硬化,TRPC5、TRPC6表达显著上调,F-actin表达减少,电镜广泛足突融合。与模型组比较,越婢汤与固精方组血清白蛋白水平升高(P<0.05),固精方组尿蛋白排泄减少(P<0.05),固精方组TRPC5、TRPC6蛋白、mRNA及免疫荧光表达下调(P<0.05,P<0.01),F-actin表达增加(P<0.05);越婢汤组TRPC5蛋白、mRNA及免疫荧光表达下调(P<0.05,P<0.01),TRPC6 mRNA及免疫荧光表达下调(P<0.01),两组足突融合较模型组减轻。结论:越婢汤、固精方可能通过调控TRPC5及TRPC6减轻足细胞损伤,发挥FSGS治疗作用。
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