【摘 要】
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目的探讨转化生长因子β2 (TGF-β2) 对体外培养的人晶状体上皮细胞 (HLEC) 转分化、细胞外基质 (ECM) 合成及结缔组织生长因子 (CTGF) 表达的影响。方法实验研究。采用不同浓度TGF-β2 (0.0、0.1、1.0、10.0μg/L) 对体外培养的HLEC诱导24 h,倒置显微镜下观察细胞形态的变化;免疫荧光法检测CTGF、间质转分化标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)
【机 构】
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目的探讨转化生长因子β2 (TGF-β2) 对体外培养的人晶状体上皮细胞 (HLEC) 转分化、细胞外基质 (ECM) 合成及结缔组织生长因子 (CTGF) 表达的影响。
方法实验研究。采用不同浓度TGF-β2 (0.0、0.1、1.0、10.0μg/L) 对体外培养的HLEC诱导24 h,倒置显微镜下观察细胞形态的变化;免疫荧光法检测CTGF、间质转分化标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA) 在细胞中的表达时实PCR和Western-blot方法检测CTGF、α-SMA、细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原纤维 (COL-Ⅰ) 和纤维连接蛋白 (Fn) 的表达。
结果正常HLEC为多角形贴壁细胞,用不同浓度TGF-β2诱导24 h后,细胞由单层多角形变为长梭形,细胞间隙变大,呈纤维细胞样改变。TGF-β2可诱导HLEC表达CTGF,并且随浓度的增加,CTGF蛋白 (0.53±0.03、0.73±0.01、0.65±0.03) 和mRNA (1.00±0.00、7.18±0.41、12.88±0.45、32.84±1.61) 表达均增强,差异有统计学意义 (F=77.55,P<0.05;F=379.0,P<0.05) 。TGF-β2能诱导HLEC转分化,浓度依赖性地促进α-SMA蛋白 (0.48±0.01、0.78±0.04、0.69±0.04) 和mRNA (1.00±0.00、2.30±0.22、3.10±0.21、3.86±0.10) 的表达,差异有统计学意义 (F=62.73,P<0.05;F=80.22,P<0.05) 。不同浓度 (0.0、0.1、1.0、10.0μg/ L) TGF-β2从基因和蛋白水平促进HLEC表达COL-Ⅰ和Fn,COL-ⅠmRNA的相对值分别为1.00±0.00、5.52±0.96、18.31±1.20、82.51±1.45,Fn mRNA的相对值分别为1.00±0.00、2.36±0.25、3.27±0.24、4.25±0.24;COL-Ⅰ蛋白表达相对值分别为0.78±0.05、1.15±0.11、2.16±0.14,Fn蛋白表达相对值为0.64±0.01、0.95±0.02、1.23±0.14,其作用呈浓度依赖性 (F=1880.52,105.30,P<0.05;F=64.44,51.81,P<0.05) 。
结论 TGF-β2可以诱导HLEC表达CTGF,促进HLEC转分化及细胞外基质的合成。 (中华眼科杂志,2013,49:822-828)
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