【摘 要】
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目的:探讨在体外模拟炎症状态下,A20基因沉默对人牙髓干细胞(h DPSCs)增殖及分化能力的影响。方法:用脂多糖(LPS)刺激h DPSCs,Western-Blot技术检测不同时间点锌指蛋白A20表
【机 构】
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军事口腔医学国家重点实验室,第四军医大学基础医学部教学实验中心,解放军第二O三医院
【基金项目】
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国家自然科学基金(81070832);第四军医大学青年英才支持计划Ⅰ类项目(2011)
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目的:探讨在体外模拟炎症状态下,A20基因沉默对人牙髓干细胞(h DPSCs)增殖及分化能力的影响。方法:用脂多糖(LPS)刺激h DPSCs,Western-Blot技术检测不同时间点锌指蛋白A20表达量的变化;通过RNA干涉技术构建A20基因沉默的细胞模型,CCK-8法检测细胞增殖能力;矿化液诱导培养后,用碱性磷酸酶检测试剂盒测定ALP的活性,茜素红染色观察矿化结节的形成,并用RT-PCT检测成牙/成骨分化相关基因ALP、DSPP、OCN、RUNX2表达水平。结果:h DPSCs在LPS刺激2 h后,A20的表达即显著增加,在接近72 h时其表达量恢复至基础水平;在模拟炎症状态下,与对照组相比,A20基因沉默后的h DPSCs,其增殖能力明显降低(P<0.05),ALP的活性、矿化结节的形成、成牙/成骨分化相关基因的表达水平均受到抑制(P<0.05)。结论:在炎症状态下,A20在早期呈现一过性的高表达,A20基因沉默能够抑制h DPSCs的增殖及分化能力。
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