【摘 要】
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目的 构建溺死相关浮游生物基因座的复合扩增体系,验证体系特异性并评估其在法医溺死诊断中的应用价值.方法 针对溺死相关浮游生物同源基因序列,设计特异性引物,并用FAM、HEX
【机 构】
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广东工业大学轻工化工学院,广东广州,510006广东工业大学轻工化工学院,广东广州510006;广州市刑事科学技术研究所,公安部法医病理学重点实验室,广东广州510440;广州市刑事科学技术研究所,公
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目的 构建溺死相关浮游生物基因座的复合扩增体系,验证体系特异性并评估其在法医溺死诊断中的应用价值.方法 针对溺死相关浮游生物同源基因序列,设计特异性引物,并用FAM、HEX、TAMRA、ROX、SIZ荧光染料分组标记,构建复合扩增体系;进行体系特异性验证;以16例实验猪样本评估体系检验效能;复合扩增体系、硅藻形态学MD-VF-Auto SEM检测法及硅藻rbcL基因PCR-CE检测法分别检测28例案件样本,比较分析应用效果.结果 该复合扩增体系共包含14个基因座,可特异性扩增35种浮游藻类和3种浮游细菌,人、3种人体共生菌及8种浮游细菌均为阴性.以该体系检测溺死实验猪,阳性率为90％,非溺死实验猪均未检出;检测溺死案件样本,阳性率为96％,非溺死案件均未检出.复合扩增体系与MD-VF-Auto SEM法检测案件尸体肺、肝和肾的阳性率均不具有统计学差异(P>0.05),但其与硅藻rbcL基因PCR-CE法检测案件肝和肾的阳性率均具有统计学差异(P<0.05).结论 本文针对多种溺死相关浮游生物14个基因建立的复合扩增体系,具备多种靶物种的特异性遗传标记,且所需检材量小,提高了检测效能,在法医溺死鉴定中具有良好的应用前景.
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