【摘 要】
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目的探讨地中海贫血(地贫)患者特异诱导式多能干细胞系(i PSCs)细胞模型的建立及造血分化能力。方法采集Hb H病引产胎儿(α地贫)的脐带血、双重杂合子β地贫输血患者(基因型
【机 构】
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中山大学附属第三医院生殖医学中心,中山大学附属第三医院不育与性医学科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（编号：81170533）
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目的探讨地中海贫血(地贫)患者特异诱导式多能干细胞系(i PSCs)细胞模型的建立及造血分化能力。方法采集Hb H病引产胎儿(α地贫)的脐带血、双重杂合子β地贫输血患者(基因型为IVS-Ⅱ-654/CD17)外周血各1例,分离单核细胞后进行短期培养,核转染再程序化为i PSCs,检测i PSCs未分化状态和多能性标志物。i PSCs与OP9细胞共培养向造血干细胞诱导分化,进行吉姆萨染色检查和流式细胞术检测造血干细胞的分化结果。结果地贫患者i PSCs表达干细胞多能性标志物Oct4、SSEA4、Tra-1-60、Tra-1-81,碱式磷酸酶染色阳性,悬浮培养可以形成类球形拟胚体,畸胎瘤形成实验显示地贫患者i PSCs可分化为内、中、外胚层细胞。流式细胞术检测结果显示CD34+细胞分别为8.71%(α-i PSCs分化结果)和4.46%(β-i PSCs分化结果)。结论α、β地贫患者外周血与脐带血可再程序化为i PSCs,该细胞系具有多能分化特性,与OP9共培养能分化为造血干细胞。
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