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来源于牛分枝杆菌的热休克蛋白65（Hsp65）在没有佐剂的情况下可作为载体分子将抗原表位递呈给免疫系统。热休克蛋白具有蛋白酶的催化活性，容易发生自溶而降解，这制约了基于Hsp65疫苗的研究。该研究中，建立了纯化Hsp65及其融合蛋白Hsp65-6×P277（P277为来源于人热休克蛋白60的肽段，线性重复6次）的方法。Hsp65与Hsp65—6×P277以可溶形式表达于大肠杆菌。在低温及添加EDTA的条件下经细胞裂解、硫酸铵沉淀及阴离子交换树脂等纯化方法，可得到电泳纯的目的蛋白。用纯化