【摘 要】
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目的原核表达、纯化、鉴定吡喃糖氧化酶(PROD),为其临床应用奠定基础。方法利用生物信息软件,比较不同种属的PROD核苷酸同源序列,优化设计PROD基因序列,委托上海捷瑞生物工程
【机 构】
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常州市武进中医医院检验科,江苏艾赛氏生物科技有限公司
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目的原核表达、纯化、鉴定吡喃糖氧化酶(PROD),为其临床应用奠定基础。方法利用生物信息软件,比较不同种属的PROD核苷酸同源序列,优化设计PROD基因序列,委托上海捷瑞生物工程有限公司构建原核表达质粒pET15b-PROD,将此质粒导入大肠杆菌工程菌株BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。其超声后的沉淀、上清液经镍离子柱亲和层析纯化、脱盐后进行活性测定,并配成应用液检测50例(30例糖尿病患者,20例健康对照)血液标本中的葡萄糖水平,分析其与葡萄糖氧化酶法(GOD法)
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