纳米SiO2暴露对人支气管上皮细胞microRNA表达水平的影响

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目的

探讨纳米SiO2短期及长期暴露对人支气管上皮细胞(16HBE)microRNA(miRNA)表达水平的影响。

方法

分别以5、10、15、20、25、30、40 μg/ml纳米SiO2溶液处理16HBE细胞24 h,采用CCK-8法检测细胞活性,并计算细胞增殖活性抑制率及半抑制浓度(IC50)。以10 μg/ml纳米SiO2溶液处理16HBE细胞至第10代(P10)和30代(P30),作为长期染毒组,并设立对照组(P0);以1/4 IC50、1/2 IC50、IC50浓度的纳米SiO2溶液和IC50浓度的微米SiO2溶液处理16HBE细胞24 h,作为短期染毒组,并设立无血清培养液组为对照组。用安捷伦miRNA微阵列芯片筛选P0、P10、P30组细胞差异表达的miRNA,并用逆转录荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法验证短期及长期染毒组与对照组miRNA的表达差异。

结果

纳米SiO2溶液染剂量为5、10、15、20、25、30、40 μg/ml的16HBE细胞增殖活性抑制率分别为:(-3.33±3.80)%、(20.40±11.73)%、(39.08±5.53)%、(55.10±5.78)%、(66.42±9.60)%、(71.67±7.34)%、(81.43±5.37)%(F=129.11,P<0.001);IC50(95%CI)为18.35(15.82~20.72)μg/ml。长期染毒组中,P10、P30及P0细胞的miRNA-494-3p表达水平分别为0.45±0.08、0.28±0.07和1.00(F=60.77,P<0.001);miRNA-19a-3p表达水平分别为2.27±0.45、1.06±0.19和1.00(F=30.05,P<0.001);miRNA-148b-3p的表达水平分别为1.78±0.29、0.88±0.19和1.00(F=30.23,P<0.001)。短期染毒组中,5、10、20 μg/ml纳米SiO2溶液及20 μg/ml微米SiO2溶液染毒组的miRNA-494-3p表达水平分别为0.99±0.04、1.38±0.19、2.13±0.14、0.81±0.25(F=57.03,P<0.001);miRNA-19a-3p的表达水平分别为0.91±0.03、1.12±0.03、0.53±0.01、0.86±0.01(F=408.78,P<0.001);miRNA-148b-3p的表达水平分别为0.95±0.02、1.22±0.00、0.54±0.02、1.15±0.04(F=264.14,P<0.001)。

结论

纳米SiO2短期及长期染毒可诱导16HBE细胞miRNA表达水平的变化,其中,长期和短期染毒对miRNA-494-3p的表达水平影响不同。

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