【摘 要】
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目的构建并应用原核表达体系表达能体外刺激人γδT细胞增殖的抗人γδTCR单链抗体。方法在成功建立稳定分泌鼠抗人γδTCR单克隆抗体杂交瘤细胞系G5-4的基础上,通过RT-PCR,
【机 构】
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中国医学科学院基础医学研究所免疫学系
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目的构建并应用原核表达体系表达能体外刺激人γδT细胞增殖的抗人γδTCR单链抗体。方法在成功建立稳定分泌鼠抗人γδTCR单克隆抗体杂交瘤细胞系G5-4的基础上,通过RT-PCR,扩增得到该单克隆抗体的重链（VH）和轻链（VL）可变区基因;通过搭桥PCR法,用连接肽（Gly4Ser）3,将VH和VL连接起来,构建了抗人γδTCR单链抗体G5-4ScFv基因。将该基因插入原核表达载体pET22b（＋）,并在大肠杆菌TransB（DE3）中经IPTG诱导表达。通过SDS-PAGE,Werstern blot进行
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