含RGDS的蜱抗凝血肽表达体系的构建

来源 :热带医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangcx1987
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目的人工合成含RGDS(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸)重组蜱抗凝血肽(tick anticoagulant peptide,TAP)基因,进行原核表达,获得融合蛋白,用表达的融合蛋白粗提取物进行凝血实验。方法参照天然TAP的氨基酸序列,设计了含RGDS的编码63个氨基酸的213个碱基(含酶切位点所加的碱基),进行全基因合成后转导人大肠杆菌DH5α中。挑选阳性克隆,并进行诱导表达,检测产物的抗凝血性质。结果PCR和核苷酸序列测定表明TAP-RGDS构建正确,在IPTG诱导下的表达产物有抗凝血活性。结论构
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