His-tag对胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中表达的影响

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为考察组氨酸标签(His-tag)对Brevibacteriumsp.DGCDC-82中胆固醇氧化酶基因(Cho-Ab)在大肠杆菌中表达的影响,将PCR扩增后得到的结构基因与pET28a(+)连接,构建重组质粒pETChoAb(不带His-tag),pETChoAbn(His-tag位于N端)和pETChoAbc(His-tag位于c端)并在大肠杆菌中进行表达。对重组酶进行酶活检测,结果表明His-Iag位于ChoAb的C端和N端,COD单位体积酶活由未带标签时的1.72U/mL分别提高到4.03U/mL
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