【摘 要】
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目的 优化紫花地丁总香豆素的提取工艺，并评价其纯化物的体外抗氧化活性和抗肿瘤活性。方法 在单因素实验的基础上，以紫花地丁总香豆素得率为响应值，以液料比、提取时间、乙醇体积分数为变量，采用响应面法优化紫花地丁总香豆素的提取工艺并验证。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法、2,2′-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）法和2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-3-氧代
【基金项目】
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四川省科技计划项目（No.2021YJ0114）； 泸州市人民政府-西南医科大学科技战略合作项目（No.2019LZXNYDJ49）；
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目的 优化紫花地丁总香豆素的提取工艺，并评价其纯化物的体外抗氧化活性和抗肿瘤活性。方法 在单因素实验的基础上，以紫花地丁总香豆素得率为响应值，以液料比、提取时间、乙醇体积分数为变量，采用响应面法优化紫花地丁总香豆素的提取工艺并验证。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法、2,2′-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）法和2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-3-氧代-1-氧（PTIO）法评价紫花地丁总香豆素纯化物的抗氧化活性。采用CCK-8法检测其对人宫颈癌细胞HeLa、人胆管细胞型肝癌细胞HCCC-9810、人肝癌细胞HepG2、人乳腺癌细胞MDA-MB-231和人非小细胞肺癌细胞A549的抑制作用；采用Hoechst 33258染色法检测其对HCCC-9810细胞凋亡形态的影响，并测定细胞中乳酸脱氢酶（LDH）和超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果 最优提取工艺为液料比25∶1（mL/g）、提取时间1.9 h、乙醇体积分数68%;3次验证实验的紫花地丁总香豆素平均得率为（21.10±0.17）mg/g,RSD为0.80%（n=3），与预测值（20.79 mg/g）的相对误差为1.49%。紫花地丁总香豆素纯化物对DPPH和ABTS自由基的半数抑制浓度（IC50）分别为21.54、17.11μg/mL，略高于抗坏血酸的15.21、12.45μg/mL；对PTIO自由基的IC50为1 422.01μg/mL，远高于抗坏血酸的37.20μg/mL；对上述5种细胞的IC50分别为（113.18±15.97）、（51.17±1.72）、（134.15±11.75）、（171.83±15.27）、（93.38±4.65）μg/mL；能促进HCCC-9810细胞凋亡，增加其LDH含量并降低SOD含量。结论 成功优化了紫花地丁总香豆素的提取工艺；所得提取物的纯化物具有抗氧化活性和抗肿瘤活性。
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