猪肾γ-谷氨酰基转移酶(GGT)的提纯及其稳定性

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目的提纯活性稳定的GGT,制备用于GGT测定的参考品.方法用差速离心法从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜,用Triton X-100溶解膜结合的酶,用抗GGT亲和层析柱提纯GGT,检测提纯品的有关特性.结果提纯品GGT比活600IU/mg蛋白,得率45.5%,未测出临床常测的酶,在不同方法间的活性比与人血清GGT相似,在特定介质中制成冻干品,经加速变性试验,在-20℃和4℃预期年失活率分别为0.02%和0.25%.结论本法提纯GGT速度快,得率高,几乎不含杂酶,稳定性好,在不同方法间与人血清酶有互换性,是用于制备酶参考品提纯GGT的理想方法.
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