【摘 要】
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为了构建一个含有人源PGK1（human phosphoglycerate kinase1）启动子的慢病毒表达载体pL-PGK—GFP．采用PCR从人组织中扩增PGK1基因的启动子部分，再用酶切一连接的方法将扩增的启动
【机 构】
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安徽师范大学生命科学学院,南京农业大学动物科技学院
【基金项目】
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“十一五”国家科技支撑计划项目(2006BAD04A01,2006BAD04A12);安徽省自然科学基金(050410201);安徽省教育厅重点项目(KJ2009A039);芜湖市科技计划重点项目(2008620)
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为了构建一个含有人源PGK1（human phosphoglycerate kinase1）启动子的慢病毒表达载体pL-PGK—GFP．采用PCR从人组织中扩增PGK1基因的启动子部分，再用酶切一连接的方法将扩增的启动子区片段亚克隆入慢病毒表达质粒pL—EGFP中，再用测序、酶切和瞬时表达的方法进行鉴定．结果是下游的eGFP基因在PGK1启动子驱动下，在293FT细胞中表达绿色荧光蛋白报告基因，这表明成功构建了慢病毒表达质粒pL—PGK-GFP．扩增的537bpPGK1启动子片段具有一定的启动效率，能在H
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