绿脓杆菌RNA降解蛋白PNPase与RNaseE表达纯化及相互作用

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目的RNA降解复合体是RNA在生物体内更新的主要工具。PNPase通过3’到5’核酸外切酶降解RNA,RNaseE参与其调控。通过对绿脓杆菌RNA降解蛋PNPase与RNaseE进行克隆表达纯化,并获取复合物蛋白,进而揭示PNPase与RNaseE对绿脓杆菌RNA的降解机制。方法对PNPase与RNaseE基因序列进行PCR扩增,构建重组质粒,分别转入E.coliB L21中表达,应用镍离子亲和层析,离子亲和层析和分子筛纯化目的蛋PNPase与RNaseE;通过Pull-down方法验证PNPase和RN
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