【摘 要】
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对来源于紫色色杆菌的ω-转氨酶基因(Genebank:JC032687.1)进行了生物信息学分析,其理论分子量为51213.42,是一种含有多个磷酸功能位点的亲水性蛋白质;利用p ET-28a(+)为载体
【基金项目】
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国家自然基金项目(21576068)资助;河北省自然基金项目(B2016202027和B2017202056)资助
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对来源于紫色色杆菌的ω-转氨酶基因(Genebank:JC032687.1)进行了生物信息学分析,其理论分子量为51213.42,是一种含有多个磷酸功能位点的亲水性蛋白质;利用p ET-28a(+)为载体在宿主细胞E.coli.Rosetta(DE3)中重组表达了融合有Car9标签(Car9-tag)的ω-转氨酶;考察了诱导条件等对ω-转氨酶表达量的影响,摇瓶培养2 h后加入终浓度为1.0 m M的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导10 h后可获得高表达量的融合ω-转氨酶,其比酶活可达1 547.16 U·g-1;采用了二氧化硅亲和吸附Car9-tagω-转氨酶对ω-转氨酶进行了分离纯化。
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