观察外源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠胶质细胞的影响,并探讨GDNF的最佳浓度,为肠神经营养治疗STC提供依据。
方法将132只清洁级SD大鼠分为STC组和对照组,每组66只,大黄混悬液灌胃建立STC模型。采用简单随机法从STC组和对照组分别取6只小鼠验证造模是否成功。两组剩余的120只大鼠采用区组随机法再各分为6组,即STC组1~6和对照组1~6,每组10只,均分别给予不处理、尾静脉注射0.9%氯化钠溶液2 mL,以及0.001、0.010、0.050、0.100 μg/L浓度梯度的重组人GDNF 2 mL,连续给药1周。蛋白质印迹法检测各组大鼠结肠组织中Sox-8的表达。采用独立样本均数t检验进行统计学分析。
结果0.001 μg/L GDNF干预后(STC组3),大鼠结肠组织中Sox-8表达水平与不予处理的STC组1比较差异无统计学意义(13.38±0.70比13.39±0.45,t=0.042,P=0.969)。0.010 μg/L GDNF干预后(STC组4),大鼠结肠组织中Sox-8表达水平高于STC组3(21.11±2.56比13.38±0.70),差异有统计学意义(t=5.040,P<0.01);0.050 μg/mL GDNF干预后(STC组5),大鼠结肠组织中Sox-8表达水平高于STC组4(31.86±1.57比21.11±2.56,t=-6.198,P<0.01);0.100 μg/L GDNF干预后(STC组6),大鼠结肠组织中Sox-8表达下降,低于STC组5(14.65±0.89比31.86±1.57,t=-16.517,P<0.01)。不予处理、0.9%氯化钠溶液,以及0.001、0.050 μg/L的GDNF干预后(STC组1、2、3、5),STC大鼠结肠组织中Sox-8的表达水平均分别低于相应对照组(t=3.394、12.103、10.302、-6.120,P均<0.05)。
结论外源性GDNF可增加STC大鼠结肠Sox-8表达,结肠胶质细胞数量的增多可修复肠神经系统,GDNF的最佳浓度可能为0.050 μg/L。