目的　建立犬骨髓间叶干细胞的体外分离、培养、扩增与鉴定方法 ,了解其生物学特性 ,为心肌梗死、心力衰竭及缓慢性心律失常的干细胞移植提供细胞材料。方法　抽取犬骨髓液 10ml,以DMEM 1∶1稀释 ,用 1 0 6 3g/mlpercoll密度分离液 ,以 6 0 0 g离心力、30min分离骨髓单个核细胞 ;以LG DMEM及 10 %FBS添加 10 0U/ml青霉素 ,10 0 μg/ml链霉素 ,2 5 μg/ml两性霉素B培养骨髓干细胞 ;利用细胞贴壁筛选法分离、培养、扩增骨髓间叶干细胞 ;应用干细胞表面标志蛋白检测 ,诱导剂诱导分化间叶组织细胞等方法进行犬骨髓间叶干细胞的鉴定。结果　分离出的犬骨髓单个核细胞约占细胞总数的 10 -4～ 10 -6,在LG DMEM与选择性血清培养基上生长良好。犬骨髓间叶干细胞孵育 2 4h即可见细胞贴壁生长 ,贴壁细胞约占接种单个核细胞总数的 10 -6。犬骨髓间叶干细胞增殖分裂迅速 ,38～ 4 8h内增殖多个细胞 ,约 72h即可增殖形成大的细胞克隆 ,7～ 10d即可布满瓶底。细胞融合时类似成纤维细胞 ,呈纺锤状 ,细胞小而密集 ,螺旋梳状排列。连续培育 10代以上 ,未见细胞形态、增殖特性发生改变。未见骨髓间叶干细胞自发分化其它类型细胞 ,仍维持原代培养细胞的增殖特性。犬骨髓间叶干细胞的表面标志SH2阳性 ,CD4 5则阴性。在化学诱导