针对单抗生产下游过程的瓶颈—蛋白A亲和层析,以提高过程产能和降低成本为目标,探讨了双柱连续流层析新方法。从过程设计的关键因素出发,比较和分析了保留时间和蛋白浓度的影响,优化分离条件,并应用于细胞培养液中分离单抗。以两种蛋白A亲和介质MabSelect SuRe和UniMab为典型介质,考察了不同保留时间和IgG浓度的穿透曲线,比较了保留时间和蛋白浓度对过程产率、介质利用率和缓冲液消耗的影响。结果表明,与常规的批次层析相比,双柱连续流层析拥有更优越的分离性能,产率和介质利用率显著提高,缓冲液消耗减少,特别适合于高流速操作。对于从细胞培养液中分离单抗,双柱连续流层析的分离性能和常规层析相当,单抗纯度97%以上、收率90%、聚集体含量低于2%、HCP含量低于300ppm,优势是过程效率显著提高,产率提高36%,介质利用率从20%～30%提高到70%～80%,,缓冲液消耗下降为常规层析过程的1/5～1/4,显示出良好的应用前景。