论文部分内容阅读
目的：探讨以人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）作为软骨组织工程种子细胞，Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖支架材料作为细胞载体及其细胞‐支架复合体成软骨的可行性。方法制备Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖多孔支架，电镜观察测定支架材料的孔径、孔隙率和亲水性，对支架材料进行相应的组织学分析。培养鉴定 P3代的hUCMSCs ，将hUCMSCs混悬液接种到Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖支架上，不加诱导剂进行培养，3周后取出样品行甲苯胺蓝、番红精O染色，Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及扫描电镜观察。结果第3代hUCMSCs高度表达CD29、CD105等间充质细胞标志，几乎不表达CD34等内皮细胞、造血细胞标志。Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖支架材料呈白色多孔泡沫状，孔隙率为（91．8±2．17）％，孔径110～230μm ，分布均匀，相互贯通。吸水膨胀率为（213．71±1．31）％，亲水性良好。甲苯胺蓝、番红精O及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈阳性。细胞‐支架复合体在培养过程中可观察到有软骨样组织形成并逐步增多，甲苯胺蓝、番红精O及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均呈阳性，电镜观察显示细胞在支架上增殖活跃，与材料黏附紧密，可见软骨样细胞及其周围大量交错连接的胶原纤维。结论 hUCMSCs与Ⅱ型胶原复合糖胺聚糖支架材料复合，可在体外不经诱导而初步构建组织工程软骨，为软骨损伤的修复奠定了一定的实验基础。