【摘 要】
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[目的]探讨细胞自噬在鼻咽癌紫杉醇耐药中的作用及其机制。[方法]以鼻咽癌亲本细胞和紫杉醇耐药细胞为研究对象。自噬抑制剂3-MA抑制自噬,si RNA下调自噬蛋白Beclin-1的表达,
【机 构】
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长沙市中南大学湘雅三医院; 南宁市中国人民解放军第三〇三医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金青年项目(81702706)
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[目的]探讨细胞自噬在鼻咽癌紫杉醇耐药中的作用及其机制。[方法]以鼻咽癌亲本细胞和紫杉醇耐药细胞为研究对象。自噬抑制剂3-MA抑制自噬,si RNA下调自噬蛋白Beclin-1的表达,分别应用集落形成实验检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测凋亡水平,蛋白印迹分析检测自噬相关蛋白和Caspase蛋白的表达水平,透射电子显微镜和荧光显微镜进行细胞形态学观察。通过基因芯片技术分析Caspase家族基因在亲本和耐药细胞中的不同表达。[结果]紫杉醇耐药细胞中自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达水平高于亲本细胞(P<0.05)。用自噬抑制剂3-MA预处理鼻咽癌耐药细胞后,CNE-1/Taxol+3-MA和HNE-2/Taxol+3-MA细胞的IC50值分别为(6.25±1.0)nmol/L、(2.19±0.19)nmol/L,与对照组相比,细胞的生长抑制率明显增加(P<0.01)。鼻咽癌紫杉醇耐药细胞转染Beclin-1-si RNA后,CNE-1/Taxol细胞和HNE-2/Taxol细胞的IC50值分别为(5.69±1.23)nmol/L、(3.08±0.67)nmol/L,转染后的细胞对紫杉醇的敏感性明显高于阴性对照组。通过3-MA和Beclin-1-si RNA抑制自噬能增加紫杉醇诱导的Caspase依赖的细胞凋亡,同时能部分逆转鼻咽癌细胞紫杉醇耐药。[结论]紫杉醇诱导的鼻咽癌细胞自噬可能是通过降低Caspase依赖的细胞凋亡,从而部分参与了紫杉醇耐药,抑制自噬能通过促进凋亡从而增加鼻咽癌细胞对紫杉醇的敏感性。
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