【摘 要】
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目的构建人源性老年痴呆(AD)单链噬菌体抗体库,为进一步筛选AD相关抗原的人源性抗体奠定基础。方法从200 ml AD病人的外周血中分离B淋巴细胞,提取总RNA,经逆转录合成总cDNA。以
【机 构】
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佳木斯大学附属第一医院检验科,深圳大学医学院解剖教研室,中山大学中山医学院解剖教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助(30400512)
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目的构建人源性老年痴呆(AD)单链噬菌体抗体库,为进一步筛选AD相关抗原的人源性抗体奠定基础。方法从200 ml AD病人的外周血中分离B淋巴细胞,提取总RNA,经逆转录合成总cDNA。以PCR技术,利用特定的引物分别扩增出人抗体的重链和轻链可变区基因片段(VH、VL),并分别克隆入噬菌粒pDAN5中,构建出含人单链抗体可变区(scFv)基因序列的pDAN5克隆载体,电转化感受态大肠杆菌XLI-Blue后,经辅助噬菌体M13KO7超感染后回收全部重组噬菌体,构建成初级噬菌体抗体库。从抗体库中随机挑选数个克
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