P-gp在膀胱癌细胞中的差异表达研究

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目的

研究P-糖蛋白(P-gp)在人膀胱癌耐阿霉素细胞株(pumc-91/ADM)及不耐药膀胱癌细胞株(pumc-91)中的差异表达。

方法

横断面研究,采用阿霉素浓度梯度诱导法从人膀胱移行细胞癌pumc-91建立人膀胱癌多药耐药细胞系pumc-91/ADM,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测pumc-91/ADM和pumc-91细胞株中P-gp mRNA的表达情况,利用蛋白免疫印迹法(Western Blot)对两种细胞中P-gp蛋白的表达进行半定量分析,同时采用免疫细胞化学技术对两种细胞中P-gp蛋白的表达进行定位及半定量分析,实验数据均使用独立样本的t检验进行分析。

结果

qRT-PCR结果显示,与pumc-91细胞相比,P-gp mRNA在pumc-91/ADM细胞中的表达水平上调了约7.74倍(t=11.97,P<0.05);利用Image J软件分析Western blot条带光密度比值,P-gp蛋白在pumc-91/ADM中的表达量(1.393±0.328)明显高于pumc-91(0.953±0.250)(t=4.35,P<0.05);通过免疫细胞化学染色发现,P-gp在两种细胞的胞膜和胞浆均有表达,且在pumc-91/ADM中的表达量明显高于pumc-91(t=11.41,P<0.05),差异均有统计学意义。

结论

P-gp在人膀胱癌耐阿霉素细胞株(pumc-91/ADM)中表达水平比其在不耐药膀胱癌细胞株(pumc-91)中表达水平显著上调。(中华检验医学杂志,2015,38:277-280)

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