糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病常见的并发症之一，视网膜色素上皮(RPE)细胞作为视网膜重要的组成细胞在DR的发生和发展中至关重要。
目的探讨自噬抑制剂3-MA对高糖培养的人RPE细胞(hRPECs)增生的影响。
方法将体外培养的hRPECs分为对照组、高糖组和3-MA＋高糖组，对照组细胞用含5 mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养基进行培养，高糖组采用含30 mmol/L葡萄糖的DMEM/F12培养基进行培养，干预组细胞先在DMEM/F12培养基中添加10 mmol/L的3-MA处理1 h后，再添加30 mmol/L葡萄糖溶液进行培养。将培养的细胞以1×105/孔的密度接种于24孔细胞培养板中，待细胞80%融合后用含体积分数0.5%胎牛血清的培养基继续孵育24 h，使细胞周期同步化。倒置光学显微镜和透射电子显微镜下观察各组jRPECs的形态及超微结构；采用CCK-8法检测各组hRPECs的增生率；采用Western blot法检测各组hRPECs中自噬相关基因微管相关蛋白轻链3B(LC3B)蛋白的表达。
结果对照组细胞生长状态良好，细胞排列整齐；高糖组细胞体积稍增大，细胞数量明显多于对照组，而3-MA＋高糖组细胞形态不规则，排列紊乱。透射电子显微镜下可见对照组细胞核呈圆形或卵圆形，亚细胞器形态均正常，未发现自噬小体；高糖组细胞中可见自噬溶酶体，而3-MA＋高糖组可见自噬小体。对照组、高糖组、3-MA＋高糖组细胞的增生率分别为(100.0±2.0)%、(116.9±5.2)%和(103.7±4.7)%，总体比较差异有统计学意义(F＝13.526，P＝0.006)，高糖组的细胞增生率明显高于对照组和3-MA＋高糖组，差异均有统计学意义(均P<0.05)，3-MA＋高糖组与对照组间细胞增生率的差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较，高糖组细胞中LC3B-Ⅰ蛋白表达减弱，LC3B-Ⅱ蛋白表达增强，而3-MA＋高糖组细胞中LC3B-Ⅰ和LC3B-Ⅱ蛋白的表达强度与对照组接近。对照组、高糖组、3-MA＋高糖组细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ值分别为0.131±0.065、2.504±0.097和0.274±0.007，组间总体比较差异有统计学意义(F＝1 694.676，P＝0.000)，高糖组细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ值明显高于对照组和3-MA＋高糖组，差异均有统计学意义(均P<0.05)，3-MA＋高糖组与对照组间细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ值的差异无统计学意义(P>0.05)。
结论高糖可激活自噬过程并促进hRPECs增生，而自噬抑制剂3-MA在一定程度上抑制自噬进程，从而发挥抑制细胞增生的作用。