【摘 要】
：
目的研制快速、特异、灵敏的检测单增李斯特菌的基因芯片。方法选择gyrB、ISR、16SrRNA、23SrRNA、hlyA、lap和pffA作为单增李斯特菌的检测靶基因，研制一种Oligo探针基因芯片，
【机 构】
：
广东省疾病预防控制中心病原微生物检验所,解放军第458医院全军肝病中心
【基金项目】
：
广东省科技计划项目（2005833701013）
论文部分内容阅读
目的研制快速、特异、灵敏的检测单增李斯特菌的基因芯片。方法选择gyrB、ISR、16SrRNA、23SrRNA、hlyA、lap和pffA作为单增李斯特菌的检测靶基因，研制一种Oligo探针基因芯片，对18个不同种属来源的已知参考生物样品进行检测和鉴定，并且采用对比试验、重复性试验、灵敏度试验和特异性试验对该j芷：片进行验证评估。结果通过对比发现IDT合成的70merOligoj告片探针在芯片打印与芯片检测两个方面较优。比较10、40和80txmol／L3个Oligo探针点样浓度，结果显示10txmol／
其他文献
目的 探讨IL-2预孵育naǐve CD4^＋ T细胞后，对其极化（polarization）方向和增殖（proliferation）能力的影响。方法用终浓度为50U／ml的IL-2分别预孵育D011．10TCR转基因小鼠和C57BL／6N小鼠naǐve CD4^＋ T细胞，在不同时间点用荧光实时定量PCR（real-time PCR）检测这两种细胞中SOCS-3（suppressor of cy
目的 观察人软骨糖蛋白-39（HCgp39）对胶原诱导型关节炎（CIA）大鼠淋巴细胞激活的影响，探讨其在类风湿关节炎（RA）发病中的作用。方法建立CIA大鼠模型，分别在建模1、2、3、4、5、6、7、8周后，分离、培养大鼠脾淋巴细胞，CCK-8法检测HCgp39对淋巴细胞增殖的影响，ELISA法检测血浆中抗HCgp39抗体及COMP的分泌水平，分析指标之间相关性。结果建模2周后，HCgp39抗原特
目的 探讨肠道病毒71型( EV71)感染患儿免疫活性细胞模式识别受体(pattern recognition receptor，PRR)及细胞因子水平的变化。方法 EV71感染患儿71例，其中轻症EV71感染组20例，重症EV71感染组25例，危重症EV71感染组26例，同年龄正常对照组20例。采用real -time PCR检测外周血单个核细胞维甲酸蛋白Ⅰ(retinoic acidinduc
脓毒症是重症监护病房(ICU)老年危重患者主要的死亡原因之一.近年来研究证实,脓毒症不仅存在促炎及抗炎反应导致的非特异性免疫功能亢进,还存在着特异性免疫抑制,其后果是对感染的易感性增加及加速患者死亡[1].本研究以CD14~+单核细胞人白细胞DR抗原(HLA-DR)、外周血淋巴细胞活化标志HLA-DR的表达及T、B、NK淋巴细胞亚群百分比在老年脓毒症患者中的变化规律,评价其在老年脓毒症的表达及预后
目的 探讨脂多糖(LPS)刺激对体外培养的人卵巢癌细胞株SKOV3的生长、Toll样受体4(TLR4)的表达、细胞活性氧(ROS)表达及6种炎性细胞因子分泌水平变化的影响.方法 用流式细胞仪测定不同浓度LPS刺激SKOV3 4 h后TLR4的表达水平;用LPS分别刺激SKOV3细胞不同时间后,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪分析TLR4表达、细胞周期分布、ROS表达水平以及细胞因子分泌水平.结
到目前为止,在革兰阴性杆菌中已发现AnnA、RmtA、RmtB、RmtC、RmtD和NpmA 6种16S rRNA甲基化酶,且编码这些酶的基因通常和超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因共处一个质粒上,通过质粒在不同的菌株之间播散[1-]4.RmtC型16S rRNA甲基化酶首次在奇异变形杆菌中被发现[4],但16S rRNA甲基化酶在奇异变形杆菌中的流行情况还不清楚.本研究的目的是对从我院2004年
肠道杆菌是一大群生物学性状相似的革兰阴性菌,传统鉴别肠道杆菌的方法主要包括细菌培养、生化反应及血清学方法等,但这些传统方法较繁、耗时.随着分子生物学技术的发展,随机扩增多态性DNA(random amplified polymor-phic DNA,RAPD)技术作为一种快速鉴定物种种属的特异性方法被广泛应用。
目的 探讨慢性囊型包虫病（CE）患者外周血单个核细胞（PBMC）Toll样受体（TLRs）2、4、7基因表达变化及血清IL-10的表达情况.方法 采用实时荧光定量PCR（FQ-RT-PCR）法检测42例慢性CE患者与2
目的 研究当归补血汤(DBT)对骨髓移植小鼠免疫功能重建作用的影响.方法 BALB/c小鼠一次性接受全身137Csγ线致死量照射8.5Gy,照射后0-4h内经尾静脉输注同基因骨髓细胞107/只,同时给于不同剂量DBT,每日灌胃1次,连续15d.于骨髓移植后30、60d,检测以下指标:外周血红细胞(RBC)、白细胞(WBC)计数,骨髓有核细胞计数,胸腺、脾细胞总数和相应淋巴细胞亚类,以及反映免疫细胞
目的 构建人IL-24的腺病毒载体Ad-IL24,观察Ad-IL24对HL-60细胞体外培养的影响.方法 以pcDNA3.0-IL24重组质粒为模板PCR扩增IL-24基因,酶切并连接到带有绿色荧光蛋白(GFP)标记的pAdTrack-CMV质粒上,Pme Ⅰ线性化重组质粒pAdTrack-CMV-IL24,并与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒载体pAdEasy-