黄芩苷对多发性骨髓瘤细胞株U266增殖、凋亡、侵袭的影响

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目的观察黄芩苷对多发性骨髓瘤细胞株U266增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法将U266细胞分为4组,空白组加入不含药物的培养基、地塞米松组加入地塞米松、黄芩苷组加入黄芩苷、地塞米松+黄芩苷组加入地塞米松和黄芩苷,分别培养。培养24、48 h时,CCK-8法检测各组OD值,以OD值反映各组细胞增殖抑制情况;培养24 h时流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法测算各组细胞凋亡率;培养12 h时Transwell侵袭实验检测各组穿膜细胞数,以穿膜细胞数表示细胞侵袭能力; RT-PCR法检测各组细胞Wnt通路调节分子β-catenin、GSK3β及下游靶基因c-Myc、cyclin D1 mRNA; Western blotting法检测各组细胞β-catenin、GSK3β蛋白。结果培养24 h时,空白组、地塞米松组、黄芩苷组、地塞米松+黄芩苷组的OD值分别为0. 33±0. 01、0. 29±0. 01、0. 30±0. 01、0. 27±0. 02,地塞米松+黄芩苷组与空白组相比,P <0. 05;培养48 h时,空白组、地塞米松组、黄芩苷组、地塞米松+黄芩苷组的OD值分别为0. 57±0. 02、0. 42±0. 02、0. 49±0. 01、0. 36±0. 02,组间相比,P均<0. 05。培养24 h时,空白组、地塞米松组、黄芩苷组、地塞米松+黄芩苷组细胞凋亡率分别为5. 4%、17. 8%、13. 8%、30. 5%,黄芩苷组与地塞米松组相比,P> 0. 05;其余各组间相比,P均<0. 05。培养12 h时,空白组、地塞米松组、黄芩苷组、地塞米松+黄芩苷组每个镜下穿膜细胞数分别为(99±8. 19)、(88. 33±6. 11)、(87. 67±2. 08)、(32. 67±3. 5)个,黄芩苷组与地塞米松组相比,P> 0. 05;其余各组间相比,P均<0. 05。与空白组相比,黄芩苷组、地塞米松组、地塞米松+黄芩苷组β-catenin、GSK3β、c-Myc、cyclin D1 mRNA的表达均下调(P均<0. 05);与空白组相比,地塞米松+黄芩苷组β-catenin、GSK3β蛋白的表达均下调(P均<0. 05)。结论黄芩苷可抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖、侵袭,促进其凋亡,作用效果与地塞米松类似;黄岑苷与地塞米松联用有协同作用,可能通过调节Wnt通路及其下游因子的表达而调控多发性骨髓瘤细胞的增殖、凋亡和侵袭。
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