【摘 要】
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目的：探讨人树突状细胞体外大量培养及鉴定方法。方法：采用免疫磁珠法分离纯化CD34+干细胞；采用含有TPO、SCF、Flt3L和IL-3的扩增培养基培养1周，以及含有SCF、Flt3L、GM-CSF和IL-4的分化培养基培养2-3周，获得CD34+细胞来源树突状细胞。采用普通光学显微镜观察细胞形态，牛鲍氏血细胞计数板进行细胞计数，荧光抗体标记、流式细胞仪检测细胞纯度和细胞表面共刺激分子的表达情况。
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第一人民医院检验科
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81971513,81871267）； 上海市青年扬帆计划项目（16YF1409200）； 上海市科委科技创新行动计划项目（19441904300）；
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目的：探讨人树突状细胞体外大量培养及鉴定方法。方法：采用免疫磁珠法分离纯化CD34+干细胞；采用含有TPO、SCF、Flt3L和IL-3的扩增培养基培养1周，以及含有SCF、Flt3L、GM-CSF和IL-4的分化培养基培养2-3周，获得CD34+细胞来源树突状细胞。采用普通光学显微镜观察细胞形态，牛鲍氏血细胞计数板进行细胞计数，荧光抗体标记、流式细胞仪检测细胞纯度和细胞表面共刺激分子的表达情况。结果：以含有TPO、SCF、Flt3L和IL-3的培养基扩展培养一周，及含有SCF、Flt3L、GM-CSF和IL-4的培养基诱导分化3周，可获得大量悬浮细胞；细胞数目扩增倍数约达50倍；普通光学显微镜下可见悬浮细胞有明显的树突状凸起；流式细胞术检测结果显示悬浮细胞中CD141和CD11c双阳性细胞（等同于单核细胞来源树突状细胞）比例达30%，此群细胞高表达HLA-DR和CD209，低表达共刺激分子CD80和CD86；细胞寿命较短，40天时培养体系中悬浮细胞和CD34+细胞来源树突状细胞数目急剧减少。结论：采用多细胞因子联合刺激可获得大量的树突状细胞，为树突状细胞的特性及功能学研究奠定了基础。
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